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        貝克曼流式細胞儀熒光微球的調試及使用

        更新時間:2022-06-15      瀏覽次數:1642
           貝克曼流式細胞儀熒光微球是一種常用的流量測量儀器,流式細胞計是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把一定的細胞亞群從中分選出來。
          
          流式細胞儀在使用前,甚至在使用過程中都要精心進行調試,以保證工作的可靠性和最佳性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
          1、激光強度:除調整反射鏡的角度以調整到所需波長的激光出光外,還要結合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為最大。
          2、液流速度:可通過操作臺數字顯示監(jiān)督,調節(jié)氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
          3、測量區(qū)光路調節(jié):這是調試工作的關鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
          
          流式細胞術中所測得的量是相對值,因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進行校準或標定,這樣才能通過相對測量獲得絕對的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能:儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩(wěn)定,有形成份形狀應是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學標準樣品,雞血紅細胞做為生物學標準樣品。微球用樹脂材料制作,或標有熒光素,或不標記熒光素。

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