你知道如何使用貝克曼DNA純化試劑盒從動物組織中提取基因組DNA嗎？

更新時間：2022-01-19

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　　貝克曼DNA純化試劑盒是根據氯化芐法構建的，能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化，從而破壞細胞壁的特性。本制品利用了這一特性，將植物樣品凍結融解后，再使用PipetTip的將植物樣品在Microtube壁上數次按壓即可破壞細胞壁。本法與傳統方法相比，省去了液氮研磨等煩瑣步驟，有利于一次性處理大量樣品。而且，本制品經過了改良，熱處理時間只需15分鐘，使用本制品從實驗開始至水相回收只需30分鐘時間。得到的基因組DNA可以進行PCR擴增及限制酶處理等。

　　全套操作約需1小時，分勻漿、細胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟，詳細說明如下。

　　勻漿和細胞裂解:

　　使用不同的實驗材料需采用不同的勻漿步驟，具體說明如下：

　　使用研缽進行勻漿時：

　?、偃?～100mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的研缽中，快速用力展研成勻漿。

　　注）下列組織請加液氮研磨至粉末狀。

　　A．富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。

　　B．富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。

　　C．富含角質蛋白的組織或堅硬的組織（如骨骼）等。

　?、诩尤?50μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1，溫和研磨30秒鐘。

　　注）使用上述①-注）的實驗材料時，請在加入SolutionA及RNaseA1后，將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。

　?、凼占?50μl研磨好的組織勻漿液移至CollectionTube中。如果勻漿體積不足650μl，請補充SolutionA至650μl，65℃保溫5分鐘。